Pengertian
Antibiotik adalah metabolit sekunder yang disekresikan oleh strain jamur dan bakteri tertentu. Seringkali antibiotik berupa bahan kimia dan terkadang polipeptida yang mempengaruhi kemampuan bakteri untuk tumbuh. Antibiotik terbagi ke dalam dua kategori, bakteriostatik dan bakterisida. Antibiotik bakteriostatik tidak membunuh tetapi menghambat beberapa proses seluler vital seperti sintesis dinding sel atau ekspresi protein. Jika antibiotik bakteriostatik dihilangkan, pertumbuhan bakteri dapat berlanjut kembali. Sedangkan antibiotik bakterisidal membunuh sel bakteri dan oleh karena itu berguna untuk mencegah kontaminasi dan menghilangkannya.
Dalam kultur sel, antibiotik umumnya digunakan untuk menjaga media dari kontaminasi biologis. Kontaminasi biologis yang umum ditemui adalah karena bakteri, jamur, dan mikoplasma. Kontaminasi yang lebih jarang disebabkan oleh virus, bahan kimia, dan kontaminasi silang dengan jenis sel lainnya. Penggunaan antibiotik yang bijaksana untuk mengendalikan kontaminasi disarankan, namun penggunaan antibiotik tidak boleh dipandang sebagai pengganti praktik aseptik selama kultur sel berlangsung.
Penggunaan antibiotik
Penggunaan antibiotik dalam kultur sel meminimalkan hilangnya sel-sel yang berharga, reagen, waktu dan tenaga yang terbuang percuma karena kontaminasi. Pemeliharaan kondisi dan teknik aseptik sangat penting untuk laboratorium penelitian yang menangani kultur sel / jaringan. Peneliti yang telah berpengalaman merekomendasikan antibiotik yang diuji-untuk kultur sel, pada konsentrasi yang memadai, digunakan saat kultur sel. Praktek ini melindungi sel-sel Anda dengan mencegah kontaminasi yang menginduksi perubahan morfologis atau fisiologis. Selain mencegah kontaminasi, antibiotik tertentu juga berfungsi sebagai agen seleksi, yang digunakan untuk memilih dan membuat sel yang ditransfusikan / dimodifikasi secara genetik untuk tujuan penelitian.
Kontaminasi Bakteri dan Jamur
Kontaminasi bakteri dan jamur paling banyak ditemukan dalam kultur sel karena kolonisasi cepat dalam media yang diperkaya. Media menjadi keruh dan berubah warna (perubahan pH) dalam beberapa jam / hari terjadinya kontaminasi. Pengamatan mikroskopis secara teratur dan penambahan antibiotik ke media kultur mencegah kontaminasi menyebar di seluruh kultur (lihat tabel di bawah).
| Antibiotic | Biosera & Sangon | Bacteria | Fungi | Yeast | Mycoplasma | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Cat. No | Pack | Gram (+) | Gram (-) | ||||
| Amphotericin B | LM-A4109 | 50/100ml | ✓ | ✓ | |||
| Ampicillin Sodium Solution (10 mg/ml, Sterile) | B540722-0010 | 10 ml | ✓ | ✓ | |||
| Antibiotic-Antimycotic 100X | XC-A4110 | 20/100ml | ✓ | ||||
| Erythromycin | A600192-0025 | 25G | ✓ | ✓ | |||
| Gentamycin Sulfate 10mg/ml | LM-A4111 | 10ml/100ml | ✓ | ✓ | ✓ | ||
| Kanamycin Sulfate Solution (30 mg/ml, Sterile) | B540726-0010 | 10 ml | ✓ | ✓ | ✓ | ||
| Neomycin Sulfate Solution (10 mg/ml, Sterile) | B540727-0010 | 10 ml | ✓ | ✓ | |||
| Nystatin | A500728-0010 | 10 ml | ✓ | ✓ | |||
| Penicillin-Streptomycin | LM-A4118 | 20/100ml | ✓ | ✓ | |||
| Penicillin-Streptomycin Solution 100X | XC-A4122 | 20/100ml | |||||
| Polymyxin B sulfate | A610318-0001 | 1G | ✓ | ||||
| Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterile | A500731-0010 | 10 ml | ✓ | ✓ | |||
| Thiabendazole | N/A | N/A | ✓ | ||||
| Tylosin | N/A | N/A | ✓ |
Catatan
No. Katalog Sangon dengan awalan hurup A dan B, selainnya merupakan Biosera.
Kontaminasi Mikoplasma
Mikoplasma adalah prokariota terkecil yang hidup bebas (0,3 μM) yang diamati sebagai bentuk filament atau kokal di bawah pengamatan mikroskop elektron. Kontaminasi Mycoplasma samar dan sangat sulit untuk ditangani. Mereka tidak terdeteksi di bawah mikroskop cahaya tetapi menghasilkan perubahan morfologis, penyimpangan kromosom dan mengubah metabolisme asam amino dan asam nukleat. Karena kurangnya dinding sel, mycoplasma resisten terhadap antibiotik yang biasa digunakan.
Kontaminasi Virus
Virus adalah kontaminan yang paling sulit dideteksi dalam kultur sel dan sulit untuk dihilangkan. Namun, kontaminasi itu hilang karena virus semata-mata bergantung pada sel inang. Sel yang terinfeksi virus menimbulkan bahaya kesehatan bagi petugas laboratorium. Penggunaan serum yang diuji BVDV secara signifikan menurunkan risiko virus.
Penggunaan Antibiotik
Antibiotik melindungi kultur yang bernilai tinggi dan tak tergantikan dan untuk menghasilkan stok selanjutnya untuk digunakan kembali. Ketika hasil yang direproduksi sangat penting, direkomendasikan agar konsentrasi optimal dari antibiotik yang sesuai ditambahkan ke dalam kultur. Antibiotik seperti larutan Penicillin-Streptomycin pada konsentrasi 50-100 I.U./ml direkomendasikan untuk kultur sel primer karena kemungkinan kontaminasi tinggi untuk beberapa minggu pertama.
Antibiotik memberi lapisan perlindungan ekstra dari faktor-faktor seperti peneliti baru yang sedang dilatih, partikulat dan aerosol. Antibiotik juga digunakan untuk memilih sel yang dimodifikasi oleh rekayasa genetika (agen seleksi). Puromycin dan hygromycin B digunakan untuk memilih dan membentuk sel-sel yang mengekspresikan gen yang resisten puromisin dan tahan-hygromycin.
Ada asumsi yang keliru bahwa antibiotik sepenuhnya buruk untuk kultur sel; pendekatan yang benar adalah dengan menggunakan konsentrasi optimal dalam mencegah kontaminasi dan melindungi sel-sel di laboratorium kultur sel Anda.
4 Alasan Memilih Kamu: FBS Biosera