A. Antibiotik Pada Makanan

Daging adalah makanan bergizi tinggi karena tinggi protein yang mengandung semua asam amino esensial serta berbagai mineral, yaitu zat besi, seng, selenium, dan magnesium. Daging juga merupakan sumber utama dari lima vitamin B kompleks, yang merupakan kofaktor penting untuk jalur metabolisme energi.

Populasi manusia telah meningkat dengan cepat, yang meningkatkan konsumsi makanan manusia, khususnya makanan yang berasal dari hewan. Oleh karena itu, permintaan akan protein hewani sangat meningkat secara global. Untuk memenuhi tuntutan tersebut, peternakan intensif dan akuakultur semakin populer dan menjadi bidang penting dalam industri makanan.

Abad kedua puluh terjadi ekspansi besar-besaran dalam peternakan, termasuk sapi, domba, babi, kuda, unggas, dan kelinci. Demikian pula, budidaya ikan, krustasea, dan moluska, juga diperkenalkan. Industri makanan modern ini perlu menggunakan agen antimikroba pada fase produksi yang berbeda untuk menyediakan produk yang aman bagi konsumen. Bahan kimia ini banyak digunakan pada hewan penghasil makanan untuk terapi, profilaksis dan tujuan metafilaksis

Antimikroba adalah bahan kimia, yang pada konsentrasi rendah memiliki sifat biologis untuk membunuh atau menghambat mikroorganisme, seperti bakteri, jamur, protozoa dan parasit. Ini adalah istilah umum yang mengacu pada sekelompok obat yang meliputi antivirus, antibiotik, anti jamur dan anti protozoa. Setelah pemberian antimikroba, residunya dapat tetap berada di jaringan hewan ternak dan makanan yang berasal darinya, seperti susu, daging dan juga telur.

Penyalahgunaan dan penggunaan secara berlebihan antimikroba ini pada hewan penghasil makanan dan akuakultur merupakan faktor utama dalam akumulasi AMR (antimicrobial resistance ) dalam makanan sumber hewani (ASF; animal source foods), khususnya daging dan produk daging. AMR ini memiliki dampak berbahaya yang parah pada kesehatan manusia. Pusat Kedokteran Hewan dan Obat-obatan, sebuah badan di bawah Food and Drug Administration (FDA) di AS, dan Uni Eropa (UE) mendefinisikan residu sebagai “zat aktif secara farmakologis (apakah prinsip aktif, penerima, atau produk degradasi) dan metabolitnya yang tertinggal dalam bahan makanan yang diperoleh dari hewan yang telah diberikan produk obat hewan tersebut”.

Secara praktis, 80% dari antibiotik yang diproduksi secara global digunakan dalam produksi hewan dan beberapa produsen hewan saat ini mengelola konsentrasi antibiotik sub-terapi untuk tujuan yang berbeda, seperti peningkatan pertumbuhan, percepatan penambahan berat badan, peningkatan pencernaan pakan ternak, peningkatan rasio konversi pakan (FCR;feed conversion ratio), dan penghambatan atau penurunan wabah penyakit. Oleh karena itu, residu obat-obatan hewan mungkin ada dalam makanan sumber hewani (ASFs) bahkan meski penggunaannya telah diatur secara ketat. Kurangnya perhatian di kalangan petani dan peternak tentang periode penarikan (WDP; withdrawal periods) dan risiko kesehatan terkait keberadaan AMR di berbagai jenis makanan, terutama di negara berkembang, diakui secara global.

B. Jenis Residu Antibiotik Yang Terdapat Pada Makanan

Antibiotik adalah zat untuk membunuh atau menghambat pertumbuhan bakteri, baik yang dihasilkan alami atau disintesis di laboratorium. Itu dapat diklasifikasikan baik menurut efeknya sebagai bakterisida atau bakteriostatik atau menurut kisaran khasiat baik luas atau spektrum sempit (3). Antibiotik yang paling umum digunakan dalam pembiakan hewan ternak adalah tetrasiklin, β-laktam, aminoglikosida, makrolida, lincosamide, dan sulfonamida

Berikut merupakan ulasan beberapa jenis residu antibiotik yang ditemukan pada sampel makanan terutama daging:

1. Tetrasiklin adalah antibiotik spektrum luas yang digunakan untuk mengobati berbagai infeksi dan juga digunakan sebagai pemacu pertumbuhan pada hewan. Sekitar 60% dari dosis oksitetrasiklin yang tertelan diserap dari saluran pencernaan dan didistribusikan secara luas di dalam tubuh, terutama ke hati, ginjal, tulang, dan gigi.

2. Sulphonamides adalah kelompok antimikroba sintetik dengan efek spektrum luas terhadap sebagian besar bakteri dan protozoa Gram-positif dan Gram-negatif. Sulfonamida banyak digunakan untuk tujuan terapeutik dan profilaksis pada manusia dan hewan. Selain itu, mereka juga dapat digunakan sebagai aditif dalam pakan ternak karena konsumsi sulfonamid yang berkepanjangan mungkin memiliki efek pemacu pertumbuhan.

3. Quinolones atau fluoroquinolones (ciprofloxacin, enrofloxacin, asam oxolinic, flumequine, asam nalidiksat, sarafloxacin, danofloxacin, orbifloxacin, marbofloxacin, gatifloxacin, dan grepafloxacin) telah banyak digunakan dalam produksi hewan dan kedokteran hewan untuk pengobatan dan pencegahan penyakit dan juga pada manusia. Ciprofloxacin dan enrofloxacin biasanya diresepkan untuk pengobatan dan pencegahan penyakit menular pada hewan ternak. Ciprofloxacin efektif melawan mikroorganisme yang resisten terhadap agen antimikroba lainnya, seperti aminoglikosida, tetrasiklin, makrolida, dan β-laktam. Enrofloxacin diketahui sebagian dimetabolisme menjadi ciprofloxacin pada sapi, dan ciprofloxacin mencapai 25 sampai 35% dari konsentrasi obat induk dalam darah.

4. Streptomisin adalah aminoglikosida yang diproduksi oleh beberapa strain Streptomyces griseus . Streptomisin terkenal dengan aktivitas anti-tuberkulosisnya, dan telah digunakan dalam kedokteran hewan untuk pengobatan infeksi bakteri Gram-negatif karena keefektifannya dan biayanya yang murah. Tindakannya didasarkan pada penghambatan protein ribosom yang menyebabkan kematian sel. Strain yang rentan termasuk Escherichia coli, Salmonella spp., Campylobacter fetal, Leptospira spp. dan Brucella spp. Residu streptomisin dapat ditemukan pada produk pertanian seperti daging, hati, ginjal, susu dan madu. Penggunaan streptomisin dalam peternakan telah dikaitkan dengan peningkatan munculnya strain resisten bakteri patogen yang berpotensi berdampak pada kesehatan manusia

C. ELISA Kit Untuk Pengujian Antibiotik

Deteksi AMR di ASF, termasuk daging dan produk daging, sangat penting untuk memastikan standar keamanan dan kualitas pangan. Deteksi AMR paling baik dilakukan dengan prosedur dua langkah, yaitu penyaringan/ekstraksi dan identifikasi dengan analisis kuantitatif. Namun, kurangnya sumber daya untuk identifikasi dan analisis kuantitatif adalah masalah utama di negara berkembang karena analisis semacam itu hanya mungkin dilakukan di laboratorium yang dilengkapi dengan baik. Tes AMR beragam dan dapat dikelompokkan menjadi empat kategori — teknik skrining mikroba, uji imunologi, metode kromatografi, dan deteksi berbasis biosensor.

Disini kami hanya akan mengulas mengenai uji imunologi, lebih spesifik pada metode ELISA.

Metode imunologi bekerja berdasarkan prinsip interaksi antibodi-antigen dan umumnya sangat spesifik dan membantu dalam menentukan AMR dalam sampel daging dan susu dari hewan penghasil makanan (FPA; food-producing animals). Tiga pendekatan berbeda untuk tes imunologi diketahui: radioimmunoassay (RIA), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), dan metode imuno-elektroforesis. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) sering digunakan untuk identifikasi antimikroba dan didasarkan pada reagen berlabel enzim. ELISA telah terbukti sangat berguna untuk skrining residu antibiotik pada daging. Tes kuantifikasi antigen ELISA tersedia dalam dua bentuk yang berbeda, langsung/direct dan tidak langsung/indirect. Sandwich ELISA tidak langsung memiliki keuntungan karena sangat spesifik dan sensitif. Sebaliknya, radioimmunoassay mengukur radioaktivitas kompleks imunologi menggunakan penghitung.

Meizheng merupakan manufaktur ELISA kit untuk veterinary drug residue atau residu obat hewan, salah satunya adalah antibiotik. ELISA kit antibiotik ini misalnya saja Jual Chloramphenicol ELISA Test Kit, Jual Quinolones ELISA Test Kit, Jual Tetracyclines ELISA Test Kit, Jual Streptomycin ELISA Test Kit dan jual antibiotik ELISA kit lainnya.

Gambar 1. Chloramphenicol ELISA Test Kit Merk Meizheng

Chloramphenicol ELISA kit adalah immunoassay berlabel enzim kompetitif tidak langsung. Antigen diprecoated pada microwell. Antigen precoated bersaing dengan antibodi (larutan antibodi) dengan chloramphenicol dalam sampel, antibodi anti-chloramphenicol berikatan dengan konjugat enzim HRP. Kemudian pipet larutan substrat ke sumur untuk mengubah warna. Warna sampel yang tidak diketahui dibandingkan dengan warna standar, dari sini konsentrasi chloramphenicol sampel dapat ditentukan

Alat-alat yang dibutuhkan untuk melakukan Uji ELISA tersebut sebagai berikut:

● Microplate Reader (450nm / 630 nm filter)
● Oscillator
● Vortex
● Centrifuge
● Homogenizer
● Constant Temperature Incubator
● Water Bath
● Termovap Sample Concentrator
● Balance (sensibility: 0.01g)
● Graduated Pipette: 10mL
● Rubber Bulb Syringe
● Centrifuge Tube: 10mL or 7mL, 50mL
● Micropipette: Single channel pipette (10-100µL, 100-1000µL)
● Multi-channel pipette (30-300µL)

Untuk lebih detailnya mengenai kelengkapan kit ELISA tersebut dapat ditemukan pada manual yang ada pada boks ELISA. Atau pun manual ELISA berupa format pdf dapat Anda tanyakan ke CS Indogen WA. +62 812-9318-5185.

Berikut merupakan list ELISA kit antibiotik merk Meizheng yang dijual oleh PT INDOGEN.

Daftar Pustaka:

Almashhadany, DA dkk. 2022. Antimicrobial Residues in Meat and Meat Products. Meat Science and Nutrition – Recent Advances and Innovative Processing Technologies. www.intechopen.com

Banerjee, SBR dkk. 2019. ANTIBIOTIC RESIDUES IN MEAT PRODUCTS AND PUBLIC HEALTH IMPORTANCE IN THE PERSPECTIVE OF DRUG RESISTANCE. Indian J. Anim. Hlth. West Bengal University of Animal & Fishery Sciences. India.

Ramatla, T dkk. 2017. Evaluation of Antibiotic Residues in Raw Meat Using Different Analytical Methods. Antibiotics Journal. www.mdpi.com