1. Definisi Mikoplasma

Gambar 1. Mycoplasma

Mycoplasma adalah bakteri terkecil dan paling sederhana yang mampu bereplikasi sendiri. Sel mycoplasma mengandung sekumpulan organel minimal yang esensial untuk pertumbuhan dan replikasi: membran plasma, ribosom, dan genom yang terdiri dari molekul DNA beruntai ganda berbentuk lingkaran. Berbeda dengan semua prokariota lainnya, mycoplasma tidak memiliki dinding sel, dan karena itu diklasifikasikan dalam kelas terpisah Mollicutes (mollis, lembut; cutis, kulit). Istilah umum Mollicutes sering digunakan sebagai istilah umum untuk menggambarkan anggota kelas ini, menggantikan istilah lama mycoplasma untuk hal ini.

Mycoplasma sering dijuluki sebagai “crabgrass” dalam kultur sel karena infeksi yang ditimbulkannya bersifat persisten, sering sulit dideteksi dan didiagnosis, serta sulit disembuhkan. Kontaminasi kultur sel oleh mycoplasma menimbulkan masalah serius di laboratorium penelitian dan industri bioteknologi yang menggunakan kultur sel. Sumber kontaminasi mycoplasma berasal dari komponen medium kultur, terutama serum, atau dari mikroba di mulut teknisi, yang menyebar melalui infeksi droplet.

2. Definisi Endotoksin

Gambar 2. Endotoksin

Endotoksin adalah molekul hidrofobik kecil yang termasuk dalam kompleks lipopolisakarida (LPS) yang membentuk sebagian besar membran luar bakteri gram negatif. Ketika bakteri mati dan membran luarnya hancur, molekul ini akan dilepaskan. Endotoksin terdiri dari tiga bagian secara struktural: lipid A, wilayah inti, dan rantai-O. Lipid A adalah glikofosfolipid yang menyimpan daerah hidrofobik karena residu asam lemak dan juga daerah ionik karena gugus fosfat dalam residu gula.

Endotoksin dapat membentuk interaksi yang stabil dengan biomolekul lain. Jika organisme gram negatif ada sebelum sterilisasi, endotoksin organisme masih ada. Namun, endotoksin tidak dihilangkan saat organisme mati. LPS dilepaskan setelah sel mati. Pengujian LPS pada produk jadi sangat penting untuk memastikan keamanan produk yang disterilkan, terutama dalam industri biologi, obat-obatan parenteral, alat kesehatan, ketahanan pangan dan air, dan sebagainya.

3. Kontaminasi Mikoplasma dan Endotoksin

Deteksi dan pengendalian kontaminasi mikoplasma sangat penting untuk menjaga praktik kultur sel Anda aman. Hal ini karena kontaminasi ini dapat mengubah sifat sel, mempengaruhi hasil eksperimen, dan tidak dapat dideteksi melalui pemeriksaan mikroskopis rutin. Berikut merupakan pentingnya pengendalian mikoplasma:

• Dampak pada Pertumbuhan Sel: Mycoplasma dapat menghambat atau mengganggu pertumbuhan sel, menyebabkan hasil yang tidak konsisten atau tidak dapat dipastikan.
• Perubahan Fisiologi Sel: Sel yang terkontaminasi dapat menunjukkan perubahan ekspresi gen, metabolisme, dan produksi protein, yang dapat mempengaruhi hasil eksperimen.
• Hasil Eksperimen yang Menyesatkan: Karena mycoplasma dapat tidak terdeteksi dalam waktu lama, hasil eksperimen dapat menghasilkan data yang tidak akurat atau tidak terpercaya.

Endotoksin adalah molekul hidrofobik kecil yang termasuk dalam kompleks lipopolisakarida (LPS). Oleh karena itu, pemantauan keberadaan LPS dalam reagen biologis sangat penting. Metode saat ini untuk deteksi endotoksin menggunakan Limulus Amebocyte Lysate (LAL), yaitu ekstrak sel darah dari horseshoe crab, yang bereaksi dengan endotoksin. Kelemahan utama dari uji LAL adalah kesulitan mengatasi penghambatan uji. Kontaminasi LPS biasanya dinyatakan dalam unit endotoksin (EU) dan umumnya 1 ng LPS sebanding dengan 1–10 EU.

Kit Deteksi Mikoplasma dan Endotoksin tersedia melalui distributor seperti PT Indogen Intertama untuk mendukung riset yang sedang Anda lakukan. Berikut produk Kit Deteksi Mikoplasma dan Endotoksin:

Untuk pertanyaan produk dan stock lebih lanjut Bapak/Ibu dapat menghubungi kontak yang tertera pada laman website Indogen berikut. Terima kasih.

Artikel:

1. Eliminasi Endotoksin dalam Proses Ekstraksi Plasmid
2. Determinasi Infeksi Mycoplasma pneumoniae dengan Metode Real-Time PCR
3. Mycoplasma: All You Need To Know

Referensi:

1. Dasaraju, P. V., & Liu, C. (1996). Infections of the respiratory system. Medical Microbiology. 4th edition.
2. HADAD, N. D., & ZUHROTUN, A. (2021). REVIEW ARTIKEL: PERBANDINGAN PENGUJIAN ENDOTOKSIN UNTUK SEDIAAN FARMASI. Farmaka, 19(4), 46-52.
3. Marcano, R., Rojo, M. Á., Cordoba-Diaz, D., & Garrosa, M. (2021). Pathological and Therapeutic Approach to Endotoxin-Secreting Bacteria Involved in Periodontal Disease. Toxins, 13(8), 533.
4. Vitraludyono, R., Asmoro, A. A., & Widjajanto, E. (2020). Ketamin Sebagai Inhibitor Kalsium Intraseluler pada Human Umbilical Vein Endothelial Cell (HUVEC) Model Sepsis. Journal of Anaesthesia and Pain, 1(1), 7-12.