A. Pengertian Mikotoksin

Mikotoksin adalah metabolit sekunder yang dihasilkan dari tanaman bijian serealia seperti jagung, gandum, kedelai yang diekskresi dari jenis jamur tertentu pada saat kondisi lingkungan tidak kondusif bagi organisme jamur tersebut. Kondisi wilayah tropis dengan cuaca yang lembab pada musim penghujan menyebabkan kontaminasi senyawa mycotoxin cukup meluas pada tanaman bijian sebagai sumber bahan baku pakan.

Keberadaan mikotoksin sering tak terelakkan karena ini adalah kontaminan alami tanaman budidaya dan buah-buahan. Bahan-bahan yang terkontaminasi tersebut beracun bagi manusia dan hewan, dan karenanya, menjadi masalah kesehatan utama untuk konsumen.

Jamur yang tumbuh pada bijian tersebut dapat mensekresikan lebih dari beberapa jenis senyawa mycotoxin, hal ini menyebabkan kontaminasi mycotoxin dalam pakan yang diformulasikan dari kombinasi berbagai bahan baku menjadi semakin komplek.

Lebih dari 600 mikotoksin yang berbeda telah diidentifikasi dan penelitian telah menunjukkan bahwa kualitas pakan dan kinerja hewan ternak dipengaruhi oleh 6 jenis mikotoksin yaitu – aflatoksin, deoxynivalenol (DON), zearalenone, fumonisin, okratoksin dan trichothecenes (T2 – H2) – dan banyak lainnya . Racun cenderung sangat stabil, tetap berada dalam pakan setelah pelet atau ekstrusi selama proses pembuatan.

B. Jenis Mikotoksin

Sebagian besar mikotoksin diproduksi oleh tiga genera jamur: Aspergillus, Penicillium dan Fusarium. Sindrom toksisitas yang disebabkan oleh asupan mikotoksin adalah dikenal sebagai mikotoksikosis.

Berikut merupakan penjelasan singkat mengenai 6 jenis mikotoksin tersebut:

1. Aflatoksin
Aflatoksin adalah salah satu mikotoksin beracun yang paling umum dan dibentuk oleh Aspergillus flavus dan Aspergillus parasiticus ditemukan di tanah, tumbuhan yang membusuk, jerami dan biji-bijian. Produksi aflatoksin terhubung ke pembentukan spora oleh berbagai spesies Aspergillus. Juga, jamur aflatoksigenik tersebut disebarluaskan di area penyimpanan, layanan pemrosesan dan di pada jalur distribusi untuk produk manufaktur.

Ada empat jenis utama aflatoksin yaitu aflatoksin B1, aflatoksin B2, aflatoksin G1 dan aflatoksin G2 bergantung pada fluoresensinya di bawah sinar UV dan mobilitas kromatografi relatif di seluruh lapisan tipis kromatografi

2. Deoxynivalenol (DON)
Deoxynivalenol (DON) adalah mikotoksin alami yang terutama diproduksi oleh Fusarium graminearum. Mikotoksin ini dikenal juga sebagai vomitoxin karena efek emetiknya yang kuat setelah dikonsumsi, karena diangkut ke otak, di mana reseptor dopaminergik bekerja. DON mungkin merupakan kontaminan biji-bijian yang paling terkenal dan paling umum. Kemunculannya dalam makanan dan pakan ternak mewakili lebih dari 90% dari total jumlah sampel dan merupakan penanda potensial adanya mikotoksin lainnya.

3. Zearalenone
Zearalenone adalah salah satu mikotoksin yang dibentuk oleh banyak spesies Fusarium, terutama F. graminearum dan selanjutnya spesies seperti Fusarium crookwellense, Fusarium culmorum, dan Fusarium equiseti, yang secara teratur mengkontaminasi tanaman serealia. Efektivitas biologis mikotoksin tersebut adalah signifikan, tetapi toksisitas sebenarnya sedikit.

4. Fumonisin
Fumonisin dibentuk oleh beberapa spesies Fusarium, terutama Fusarium verticillioides, Fusarium proliferatum, dan Fusarium nygamai, selain Alternaria alternata f. sp. Lycopersici [36]. Fumonisin B1 adalah yang paling banyak diproduksi oleh anggota keluarga ini. Fusarium verticillioides, spesies utama ekonomi penting dan ada di semua jagung.

5. Ochratoxin A
Ochratoxin A diproduksi oleh banyak spesies dari Aspergillus, melibatkan Aspergillus alliaceus, Aspergillus auricomus, Aspergillus carbonarius, Aspergillus glaucus, Aspergillus melleus, dan Aspergillus niger serta Penicillium verrucosum. Ini adalah kontaminan makanan yang cukup umum, didefinisikan sebagai nefrotoksin kuat untuk semua spesies hewan.

6. Trichothecenes (T2 – H2)
Beberapa genera jamur, termasuk Fusarium, Stachybotrys, Myrothecium, Trichothecium, Trichoderma, Cephalosporium, Cylindrocarpon, Verticimonosporium, dan Phomopsis, adalah penghasil trichothecene. Trichothecen dikategorikan sebagai makrosiklik atau non-makrosiklik, tergantung pada adanya ester makrosiklik atau jembatan ester-eter antara C-4 dan C-15.

C. Meizheng Manufaktur ELISA kit Mikotoksin

Prosedur analitis untuk menemukan dan mengidentifikasi mikotoksin adalah penting dalam memastikan manajemen risiko yang tepat. Dengan lebih dari 15 tahun pengalaman di bidang ini, Meizheng menyediakan jangkauan terluas dari solusi pengujian mikotoksin.

Selain metode cepat seperti kit lateral flow dan ELISA kit mycotoxin, Meizheng pun menawarkan standard material mikotoksin, kolom immunoaffinity cleanup (IAC) dan peralatan laboratorium yang dibutuhkan seperti ELISA reader Stat Fax 4700 beserta kelengkapan lainnya.

Meizheng sebagai bagian dari Perkin Elmer Group menawarkan portofolio alat dan kit uji mikotoksin terlengkap untuk mendeteksi mikotoksin yang terdapat dalam komoditas pertanian, produk biji-bijian dan formulasi pakan. Solusi yang ditawarkan meliputi immunoassays seperti uji ELISA mycotoxin dan rapid test lateral flow.

Berikut merupakan daftar ELISA kit mikotoksin dari merk Meizheng.

D. Metode ELISA Untuk Deteksi Mycotoxin Pada Pakan Ternak

1. ELISA adalah
Enzyme-linked immunosorbent assay atau biasa disingkat ELISA adalah teknik immunoassay sensitif yang menggunakan enzim yang terkait dengan antibodi atau antigen sebagai penanda untuk mendeteksi protein tertentu, seperti antigen atau antibodi. ELISA digunakan untuk mendeteksi atau mengukur analit dalam sampel pakan ternak.

Sebagai contoh berikut merupakan ELISA kit Total Aflatoxins ELISA Test Kit dari merk Meizheng.

Gambar 1. Total Aflatoxins ELISA Test Kit

2. Bagaimana Cara Kerja ELISA
Sebagai pemimpin dalam industri pengujian keamanan pangan dan pakan, PerkinElmer melalui salah satu merknya yaitu MeizhengBio mengembangkan, memproduksi dan memasarkan berbagai kit ELISA untuk skrining makanan. Rangkaian kit uji makanan kuantitatif kami dapat mendeteksi racun alami seperti mikotoksin, hormon, antibiotik dan berbagai residu obat hewan lainnya. Kit ELISA untuk skrining makanan ini diproduksi dengan standar kualitas internasional ISO 9001.

Cara Kerja ELISA Kit

Kit pengujian makanan kuantitatif Meizheng cepat, hemat biaya, didasarkan pada uji ELISA kolorimetri yang kompetitif di mana antibodi telah dilapisi di sumur pelat dan terdiri dari protokol dasar berikut:

● Sampel cair yang mengandung analit target ditambahkan ke dalam microwell yang dilapisi dengan antibodi spesifik analit. Setiap analit target dalam sampel berikatan dengan antibodi.
● Antibodi atau antigen yang terhubung dengan enzim ditambahkan ke dalam microwell, juga mengikat antibodi spesifik analit yang dilapisi ke microwell.
● Substrat ditambahkan yang mengubah warnanya saat berinteraksi dengan enzim yang terkait dengan analit atau antibodi.
● Perubahan warna diukur dengan ELISA reader misalnya saja Stat Fax 4700 atau Allsheng AMR100.
● Kuantisasi analit ditentukan dengan membandingkan hasil sampel uji terhadap kurva standar konsentrasi analit yang diketahui.

Sekiranya Anda membutuhkan informasi lebih detail mengenai kit ELISA mycotoxin, mohon untuk menghubungi CS Indogen di WA. +62 812-9318-5185.

Daftar Pustaka:

Rasha M. Elkenany dan Amal Awad. 2020. Types of Mycotoxins and different approaches used for their detection in foodstuffs. Mansoura Veterinary Medical Journal. Faculty of Veterinary Medicine, Mansoura University, Mansoura. Egypt.

Lakshmi Gompa. 2013. Thesis. “OCHRATOXIN A”: Evaluation of Methodologies for Determination aluation of Methodologies for Determinationof of Ochratoxin A in Food Commodities, Contamination Levels in Different Products Available in the US Market and Evaluation of Fungal Microbiota Associated with Some of the Products. Food Science and Technology, University of Nebraska.