Semua Tentang Kamu: Fetal Bovine Serum (FBS)

Published by Administrator at February 10, 2020

Pengertian

Fetal bovine serum (FBS) adalah suplemen pertumbuhan yang paling banyak digunakan untuk media kultur sel karena tingginya kandungan faktor pemacu pertumbuhan embrionik. Ketika digunakan pada konsentrasi yang tepat, ia memasok banyak komponen yang dibutuhkan dan telah terbukti memenuhi persyaratan metabolisme spesifik untuk kultur sel.

Baca juga artikel mengenai FAQ Fetal Bovine Serum (FBS) di sini

Penggunaan

FBS digunakan dalam berbagai aplikasi. Salah satu kegunaan utama FBS adalah dalam kultur sel eukariotik, di mana ia menyediakan banyak nutrisi penting dan faktor pertumbuhan yang memfasilitasi kelangsungan hidup dan proliferasi sel. Namun, penting untuk dicatat bahwa FBS dalam kultur sel manusia dapat memperkenalkan artefak penelitian; sel manusia yang dikultur dengan sera manusia berperilaku berbeda dari sel yang dikultur dengan FBS.

FBS juga digunakan dalam penelitian, pembuatan, dan pengendalian vaksin manusia dan hewan dan obat biotek, dan digunakan untuk menghentikan pencernaan tripsin atau untuk berperan sebagai pelindung dalam kriopreservasi. Media kultur sel tanpa serum apa pun telah digunakan selama bertahun-tahun. FBS mungkin bukan suplemen terbaik untuk kultur sel. Sebagai contoh, bovine serum albumin dengan insulin-transferrin-sodium selenite dan / atau faktor pertumbuhan epidermal dalam medium kultur meningkatkan kualitas embrio sapi dan invasi trofoblas dibandingkan dengan fetal bovine serum.

Proses Produksi

1. Pengumpulan FBS

Dalam proses pembuatan FBS, seluruh darah dikumpulkan secara aseptik dalam kantong plastik steril sekali pakai dan dibiarkan menggumpal. Setelah serum dipisahkan dari gumpalan, serum dikumpulkan dan dibekukan. Mengontrol pengumpulan pada awal proses adalah faktor penting dalam kualitas produk serum nantinya. Hanya bahan baku yang memenuhi spesifikasi yang disetujui untuk lanjut diproduksi.

2. Memproses sampel serum

Bahan baku serum yang dipilih dicairkan, diuji kandungan endotoksin dan hemoglobinnya dan hanya bahan yang memenuhi syarat yang dikumpulkan. Semua dicampur di bawah kondisi dingin dan disaring dengan membran agar steril sesuai dengan protokol filtrasi yang divalidasi dengan baik. FBS diproduksi melalui serangkaian prefilters dan filter membran. Langkah filtrasi meliputi penggunaan tiga filter membran kelas sterilisasi 0,1 mikron secara berseri.

Setelah filtrasi, serum dimasukkan ke dalam botol dengan proses pengisian aseptik yang telah divalidasi untuk memastikan sterilitas produk akhir. Produk serum diproduksi pada ruang yang terkendali (kamar bersih) yang dirancang khusus sehingga tekanan udara dan partikel terkendali. Area manufaktur adalah lingkungan kelas 100.000 (ISO 8). Botol dan peralatan steril disimpan di lingkungan kelas 10.000 (ISO 7) dan ruang pengisian adalah lingkungan kelas 1000 (ISO 6) dengan laminar air flow 100 (ISO 5). Kamar bersih dimonitor secara teratur untuk mengetahui tingkat partikel dan mikroba, memastikan bahwa sistem penanganan udara, protokol pembersihan dan personelnya memenuhi standar kualitas. Setelah diisi, produk akhir dengan cepat dibekukan hingga -20ºC dan di simpan di karantina sampai semua tes kontrol kualitas telah selesai.

Kontrol kualitas

Setiap lot FBS diuji untuk memastikan bahwa serum memenuhi spesifikasi seperti yang tertulis. Rilis produk akhir dilakukan setelah meninjau semua catatan produksi dan kontrol kualitas untuk menentukan kepatuhan terhadap semua prosedur tertulis yang telah disetujui. Tes meliputi: Physical and Chemical Tests, Biochemical Tests, Microbiological Tests dan Biological performance.

Jenis FBS

Manufaktur memproduksi beberapa jenis FBS yang disesuaikan dengan kebutuhan penelitian atau pengujian yang dilakukan, termasuk penelitian stemcell, immunoassay, antibodi, dan banyak lagi lainnya. Berikut merupakan beberapa pengertian jenis FBS yang biasanya ada pada label botol FBS.

Product	Description details/usage
GAMMA-IRRADIATED FBS	Iradiasi gamma adalah proses yang melibatkan paparan produk dengan foton gamma energi tinggi yang dilepaskan oleh radioisotop, seperti kobalt 60. Energi ini ditransfer dari foton ke produk,sehingga organisme mengalami inaktivasi karena ionisasi ikatan asam nukleat.
DIALYZED FBS	Umumnya sel yang tumbuh dalam kultur membutuhkan semua komponen dari media pertumbuhan untuk mempertahankan kapasitas proliferasi mereka. Namun, ada penelitian yang tidak membutuhkan komponen tersebut, sehingga perlu dihilangkan dari serum. Metode yang paling umum digunakan untuk menghilangkan konstituen ini adalah dialisis seluruh serum. Untuk dialisis dengan diafiltrasi, serum disirkulasikan melalui serat berlubang dengan metode konsentrasi. Namun filtrat kemudian digantikan dengan penambahan garam fisiologis ke dalam serum.
HEAT INACTIVATED FBS	Inaktivasi panas serum dilakukan dengan menaikkan suhu serum hingga 56oC dan mempertahankan suhu tersebut selama 30 menit. Inaktivasi panas adalah metode pilihan untuk menghancurkan komplemen dan untuk memastikan bahwa sel tidak akan dilisis dengan pengikatan antibodi.
EMBRYONIC STEM CELL TESTED FBS	FBS khusus ini dibuat untuk memastikan stabilitas saat membiakkan sel ES dengan skrining untuk efisiensi plating, morfologi koloni, dan sitotoksisitas dengan tetap mempertahankan sel dalam keadaan tidak terdiferensiasi.
MESENCHYMAL STEM CELL TESTED FBS	FBS khusus MSC telah diskrining terlebih dahulu untuk hal-hal berikut: Kemampuan diferensiasi sel punca, morfologi, pertumbuhan dan ekspansi sel dan efisiensi klonal. Setiap lot FBS diuji secara ekstensif untuk kemampuannya mendukung pertumbuhan in vitro dan ekspansi hMSC yang tidak berdiferensiasi.
CHARCOAL-STRIPPED FBS	FBS ini dirancang khusus untuk digunakan dalam kultur yang membutuhkan kadar hormon, steroid, atau faktor pertumbuhan dalam serum yang lebih rendah, seperti pada penelitian mengenai insulin dan estrogen. Prosedur produksi meliputi penggunaan arang dan dekstran untuk menghilangkan hormon dari FBS.