Pengujian Aktivitas Mitokondria dengan Kit dan Dye Fluorescence (ABPBio)

Pengujian Aktivitas Mitokondria dengan Kit dan Dye Fluorescence (ABPBio)

Pengujian Aktivitas Mitokondria dengan Kit dan Dye Fluorescence (ABPBio)

Mitokondria adalah organel bermembran ganda yang terdapat di hampir semua sel eukariotik dan berperan sebagai “pembangkit tenaga” sel. Fungsi utamanya adalah menghasilkan energi dalam bentuk ATP melalui proses fosforilasi oksidatif. Dalam proses ini, produk katabolik seperti asam lemak, glukosa, badan keton, dan asam amino dimanfaatkan sebagai bahan bakar dalam siklus TCA untuk menghasilkan substrat energi yang kemudian digunakan dalam rantai transpor elektron (ETC) guna menjalankan fosforilasi oksidatif.

Proses fosforilasi oksidatif berlangsung di membran dalam mitokondria. Karena membran dalam ini bersifat tidak dapat ditembus oleh sebagian besar ion dan molekul kecil, terjadi pemompaan proton yang menciptakan potensial membran. Potensial ini kemudian dimanfaatkan oleh enzim ATP sintase untuk mengubah ADP menjadi ATP. Oleh karena itu, sifat impermeabel dari membran dalam serta potensial membran mitokondria menjadi aspek penting dalam menjalankan fungsi vital mitokondria sebagai pusat produksi energi sel.

Terdapat beberapa peran lain dari mitokondria selain pembentukan ATP, yaitu dapat menghasilkan antioksidan dan senyawa intermediet, serta dapat merespon stimulus apoptosis melalui lepasnya sitokrom C ke sitosol. Proses apoptosis dapat terhambat apabila terdapat kerusakan pada mitokondria. Ketika terjadi kerusakan, produksi sitokrom C meningkat di matriks mitokondria. Sitokrom C kemudian memicu sintesis Apoptotic Activating Factor 1 (APAF 1) oleh ribosom pada retikulum endoplasmik. Faktor ini, bersama dengan dATP, membentuk kompleks yang disebut apoptosom.

Pembentukan apoptosom menyebabkan terbukanya pori transien (PT pore) pada membran mitokondria, yang meningkatkan permeabilitasnya. Perubahan ini akan mengaktifkan caspase inisiator, yaitu caspase 9, yang kemudian mengaktifkan caspase 3. Caspase 3 bertindak sebagai caspase eksekutor dan menginduksi sintesis berlebih dari enzim DNAase. Aktivitas DNAase ini menyebabkan fragmentasi kromosom, yang pada akhirnya menyebabkan kematian sel melalui mekanisme apoptosis.

Gambar 1. Aktivasi sistem Caspase oleh sitokrom C.(Sumber: Ahsani, D.N. 2014)

Gambar 1. Aktivasi sistem Caspase oleh sitokrom C.
(Sumber: Ahsani, D.N. 2014)

Indogen menyediakan berbagai kit dan dye flourescence untuk berbagai pengujian aktivitas mitokondria. Berikut merupakan produk-produk dari ABPBio yang kami suplai.

Tabel 1. Produk Kit Uji Aktivitas Mitokondria Brand ABPBio

Catalog Number Product Description Detection Method
A025 eGFP Annexin V and PI Apoptosis Kit Fluorescent

PI: 535/617 nm;

eGFP: 475/509 nm

A026 FITC Annexin V and PI Apoptosis Kit Fluorescent

PI: 535/617 nm;

FITC: 495/520 nm

A027 Andy Fluor™ 488 Annexin V and PI Apoptosis Kit Fluorescent

PI: 535/617 nm

Andy Fluor™ 488: 495/520 nm

A028 Apoptotic, Necrotic, and Healthy Cells Detection Kit Fluorescent

PI: 535/617 nm;

Andy Fluor™ 488: 495/520 nm; Hoechst 33324: 350/460 nm

A044 Caspase-3 Z-DEVD-R110 Assay Kit Fluorescent

Ex/Em: 496/520 nm

A048 JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Detection Kit Fluorescent

Ex/Em: 514/529, 590 nm

A049 TUNEL Chromogenic Apoptosis Detection Kit Colormetric

Ex/Em: –

A050 TUNEL Andy Fluor™ 488 Apoptosis Detection Kit Fluorescent

Ex/Em: 495/520 nm

A051 TUNEL Andy Fluor™ 594 Apoptosis Detection Kit Fluorescent

Ex/Em: 590/615 nm

A052 TUNEL Andy Fluor™ 647 Apoptosis Detection Kit Fluorescent

Ex/Em: 650/665 nm

A060 iClick™ TUNEL Andy Fluor™ 488 Imaging Assay Fluorescent

Ex/Em: 495/520 nm

A061 iClick™ TUNEL Andy Fluor™ 555 Imaging Assay Fluorescent

Ex/Em: 555/575 nm

A062 iClick™ TUNEL Andy Fluor™ 594 Imaging Assay Fluorescent

Ex/Em: 590/616 nm

A063 iClick™ TUNEL Andy Fluor™ 647 Imaging Assay Nuclear stains Fluorescent

Ex/Em: 650/668 nm

Tabel 2. Produk Annexin Fluorescence Uji Aktivitas Mitokondria Brand ABPBio

Catalog Number Product Description Laser Emission Recomended Filter
A029-1 Annexin V, recombinant
A029-2 Annexin V, recombinant
A030 eGFP Annexin V 488 nm 509 nm 530/30 nm
A031 Biotin-X Annexin V
A032 Andy Fluor™ 350 Annexin V UV 445 nm 450/40 nm
A033 FITC Annexin V 488 nm 519 nm 530/30 nm
A034 Andy Fluor™ 488 Annexin V 488 nm 520 nm 530/30 nm
A035 Andy Fluor™ 555 Annexin V 532 nm 565 nm 575/26 nm
A036 Andy Fluor™ 568 Annexin V 561 nm 603 nm 610/20 nm
A037 Andy Fluor™ 594 Annexin V 590 nm 617 nm 630/20 nm
A038 Andy Fluor™ 647 Annexin V 633 nm 665 nm 661/8 nm
A039 Andy Fluor™ 680 Annexin V 635 nm 700 nm 700/20 nm

Tabel 3. Produk Fluorescence Uji Aktivitas Mitokondria Brand ABPBio

Catalog Number Product Description Ex/Em (nm) Applications
C040 MitoTrack™ Green FM 490/516 Mitochondria  stain
C041 MitoTrack™ Orange CMTMRos 554/576 Mitochondria  stain
C042 MitoTrack™ Red CMXRos 579/600 Mitochondria  stain
C054 MitoTrack™ Red FM 580/644 Mitochondria  stain
C043 MitoTrack™ Deep Red FM 645/665 Mitochondria  stain
C044 Rhodamine 123 505/534 Mitochondria  stain
C261 DHR 123 [Dihydrorhodamine 123] Mitochondria  stain
C045 JC-1 Dye 514/529;

585/590

Mitochondria  membrane potential
C046 JC-9 Dye 514/529;

585/590

Mitochondria  membrane potential
C259 MitoSOX Red 396/610 Mitochondria superoxide indicator

Untuk pertanyaan produk dan stok lebih lanjut Bapak/Ibu dapat menghubungi kami PT. Indogen melalui email asri.indogen@gmail.com atau melalui WhatsApp berikut untuk fast respon WhatsApp Indogen.

Artikel Terkait:

  1. https://indogen.id/deteksi-ferroptosis-dan-cuproptosis/
  2. https://indogen.id/marker-marker-dalam-penglasifikasian-kanker-payudara-triple-negatif-part-2-klasifikasi-patologi-karakterisasi-genomik-proteomik-dan-analisis-transkriptomik/
  3. https://indogen.id/marker-marker-dalam-penglasifikasinan-kanker-payudara-triple-negatif-part-1-klasifikasi-molekuler/
  4. https://indogen.id/reagents/
  5. https://indogen.id/peran-peran-metode-flow-cytometry-dalam-integrasi-teknik-deteksi-laboratorium/

Sumber:

  1. Ahsani, D. N. (2014). Mitokondria sebagai target terapi kanker. JKKI: Jurnal Kedokteran dan Kesehatan Indonesia, 1-11.
  2. Laksono, S., & Fiyani, N. (2022). Defisiensi Mikronutrien pada Gagal Jantung: Disfungsi Mitokondrial sebagai Patofisiologi. UMI Medical Journal, 7(2), 141-151.
  3. Meles, D. K., Mustofa, I., & Wurlina, P. (2018). Aktivitas Alkaloid Achyranthes Aspera Linn Penyebab Kematian Sel Kanker Payudara terhadap Terbentuknya Apoptosome Pada Mitokondria dan Fragmentasi Chromosom.