Pendahuluan

Kultur sel merupakan salah satu teknik utama dalam ilmu hayati. Istilah kultur sel digunakan secara umum untuk pengambilan sel, jaringan, atau organ dari hewan atau tumbuhan dan penempatannya selanjutnya ke dalam lingkungan buatan yang mendukung kelangsungan hidup dan/atau perkembangbiakannya. Persyaratan lingkungan dasar agar sel dapat tumbuh secara optimal adalah: suhu yang terkontrol, substrat untuk perlekatan sel, dan media pertumbuhan serta inkubator yang sesuai yang mempertahankan pH dan osmolalitas yang benar (Arora, 2013).

Dalam kultur sel, terdapat langkah langkah terpenting dan krusial yakni pemilihan media pertumbuhan yang tepat untuk budidaya in vitro. Media pertumbuhan atau media kultur adalah cairan atau gel yang dirancang untuk mendukung pertumbuhan mikroorganisme, sel, atau tanaman kecil. Selain sebagai nutrisi, media juga membantu mempertahankan pH dan osmolalitas. Namun, secara utama fungsi mempertahankan pH dalam kultur sel dapat disokong oleh larutan penyangga fosfat.

Larutan penyangga fosfat atau yang dikenal dengan Phosphate Buffer Saline (PBS) adalah larutan penyangga yang umum digunakan dalam penelitian biologi. Larutan ini berupa larutan garam berbasis air yang mengandung natrium fosfat dan natrium klorida. PBS diketahui bersifat isotonik terhadap sel biologis, oleh karena itu PBS memiliki banyak aplikasi. Larutan ini telah digunakan dalam protokol laboratorium untuk pengenceran, pencucian suspensi sel, pembilasan serpihan dan pelat kultur serta aditif pada media kultur sel.

PBS tersedia secara komersial dalam berbagai formulasi dengan kalsium dan magnesium (+/+ PBS) atau tanpa (–/– PBS). Selain itu, buffer berbasis PBS telah digunakan dalam industri farmasi untuk menilai pelepasan obat, stabilitas obat, serta buffer untuk kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC). PBS telah digunakan sebagai buffer dalam sel bahan bakar mikroba untuk menjaga kondisi pH dan konduktivitas larutan. Larutan garam ini telah digunakan untuk menjaga media dalam kisaran pH fisiologis dan menjaga keseimbangan osmotik intraseluler dan ekstraseluler (Trivedi dkk., 2015).

Jenis-jenis produk PBS Buffer

PBS atau Phosphate Buffer Saline adalah larutan yang sering digunakan dalam kultur sel untuk menjaga kestabilan pH dan menyediakan ion-ion yang dibutuhkan untuk berbagai proses seluler. Terdapat beberapa macam PBS buffer yang digunakan dalam kultur sel. Pemilihan produk dapat tergantung pada kebutuhan spesifik penelitian atau aplikasi kultur tersebut. Berikut adalah beberapa macam PBS yang biasa digunakan:

1. PBS 1x (Standar)
   PBS ini adalah formulasi standar yang paling sering digunakan dalam kultur sel untuk mencuci sel, menjaga keseimbangan ion, dan mengatur pH dalam kultur. Berikut adalah komposisi dari PBS standar.

Tabel 1. Komposisi Phosphate Buffer Saline (St-Pierre dan Sato, 2022)

2. PBS 10x
   PBS 10x lebih terkonsentrasi daripada PBS 1x. Biasanya PBS 10x digunakan untuk persiapan larutan PBS dengan pengenceran 1:10. Buffer jenis  ini digunakan untuk menghemat penyimpanan atau untuk penelitian yang memerlukan konsentrasi tinggi.

4. PBS tanpa kalsium dan magnesium
   PBS ini memiliki komposisi yang sama seperti PBS standar namun tanpa kandungan kalsium (Ca²⁺) dan magnesium (Mg²⁺). PBS jenis ini sering digunakan untuk proses-proses seperti pencucian sel yang akan dipisahkan atau diambil dari kultur. Hal ini karena kalsium dan magnesium dapat mempengaruhi adhesi sel.
5. PBS dengan kalsium dan magnesium
   Berbeda dengan jenis PBS Buffer sebelumnya, PBS jenis ini memiliki komposisi penambahan ion kalsium dan magnesium. Buffer ini digunakan dalam eksperimen yang memerlukan stabilitas ikatan sel atau interaksi antara sel, misalnya pada eksperimen pengenalan molekul atau pemisahan sel.
6. PBS dengan tambahan glukosa
   PBS jenis ini terdiri dari PBS standar ditambah dengan glukosa (sekitar 1 g/L). Buffer ini digunakan untuk kultur sel yang memerlukan sumber energi tambahan selama pengolahan misalnya saat menginkubasi sel dalam media yang tidak mengandung glukosa.
7. PBS dengan tambahan detergen (seperti Triton X-100 atau Tween-20)
   Selain terdapat jenis PBS dengan tambahan glukosa, juga terdapat PBS standar dengan penambahan detergen dalam konsentrasi rendah. PBS dengan detergen sering digunakan dalam prosedur pelisisan sel atau ekstraksi protein. Hal ini karena detergen membantu memecah membran sel dan melepaskan isi sel.

Produk PBS Buffer

Berikut adalah beberapa produk PBS Buffer yang dapat kami suplai dari brand Elabscience dan Solarbio.

Brand	Nomor Katalog	Nama Produk	Foto Produk
Elabscience	PB180327	Phosphate Buffer (PBS, 1 ×)
Elabscience	PB180521	Phosphate Buffer (PBS), 10 ×
Elabscience	E-BC-R187	PBS Buffer, pH7.4
Elabscience	PB180327A	Phosphate Buffer (PBS, 1 ×), with P/S
Solarbio	D1040	D-PBS (without calcium, magnesium, phenol red) Size: 500ml, 10x500ml
Solarbio	D1042	D-PBS (without calcium, magnesium, phenol red) 10X1L, 100X1L
Solarbio	D1043	D-PBS (with calcium, magnesium, without phenol red) 1L
Solarbio	P1000	PBS Tablets 100ea
Solarbio	P1001	PBST (Tablets) 100ea
Solarbio	P1002	D-PBS (Tablets, without Calcium and Magnesium)
Solarbio	P1003	0.01M PBS (powder, pH7.2-7.4) 10x2L, 100X2L
Solarbio	P1004	DPBS, free of calcium and magnesium ions,10× 500ml
Solarbio	P1006	DPBS, containing calcium and magnesium ions,10× 500mL
Solarbio	P1010	0.01M PBS (powder, pH7.2-7.4)
Solarbio	P1020	PBS,1× (pH7.2-7.4，0.01M，cell culture) Size: 500ml, 10x500ml
Solarbio	P1022	PBS,10× Size: 500ml, 10x500ml
Solarbio	P1031	PBST, 1× (PH7.2-7.6, 0.01M) 500ml, 10x500ml
Solarbio	P1032	PBS,20× (pH7.2-7.4，0.01M) 500ml, 10x500ml
Solarbio	P1033	PBST,10× 500ml, 10x500ml

Untuk pertanyaan produk dan stock lebih lanjut Bapak/Ibu dapat menghubungi kami PT. Indogen melalui email sales.indogen@gmail.com atau melalui WhatsApp berikut untuk fast respon WhatsApp Indogen.

Referensi :

Arora, M. (2013). Cell culture media: a review. Mater methods, 3(175), 24.

St-Pierre G, Sato S. Hemagglutination assay for the estimation of a carbohydrate-binding activity and determination of its carbohydrate-binding specificity. 2021 Oct 17 [Updated 2022 Mar 30]. In: Nishihara S, Angata K, Aoki-Kinoshita KF, et al., editors. Glycoscience Protocols (GlycoPODv2) [Internet]. Saitama (JP): Japan Consortium for Glycobiology and Glycotechnology; 2021-. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK593838/

Trivedi, M. K., Branton, A., Trivedi, D., Nayak, G., Mishra, R. K., dan Jana, S. (2015). Comparative Physicochemical Evaluation of Biofield Treated Phosphate Buffer Saline and Hanks Balanced Salt Medium. American Journal of Bioscience 3(6), 267-277. https://hal.science/hal-01497316/

Artikel Terkait

1. https://indogen.id/pbs-tablet-phosphate-buffer-saline-50-tablet/
2. https://indogen.id/workshop-the-8th-molecular-and-cell-culture-cultivate-consistency-cell-culture-di-institute-of-tropical-disease-universitas-airlangga/
3. https://indogen.id/training-bersama-elabscience-di-wuhan-china-bagian-3-imunohistokimia-immunohistochemistry-ihc/
4. https://indogen.id/workshop-laboratorium-fk-kmk-ugm-analisis-sel-t-regulatory-t-reg-dari-sampel-pbmc-dengan-flow-cytometry/
5. https://indogen.id/cell-culture-supplements/
6. https://indogen.id/perbedaan-sel-kultur-adheren-dan-suspensi/