ELISA dikenal sebagai metode yang cepat dan efektif untuk mendeteksi berbagai analit. Demi keberhasilan teknik ELISA yang dilakukan, peneliti harus memperhatikan betul kit maupun komponen lain yang dibutuhkan selama proses pengerjaannya. Dalam pengerjaan teknik ELISA ada beberapa instrumen yang perlu dipersiapkan oleh peneliti. Instrumen utama yang harus ada yaitu Microplate Reader atau ELISA reader. Instrumen ini berfungsi untuk membaca optical density dari analit yang dituju dalam larutan sampel. Selain ELISA reader, instrumen lain yang juga berpengaruh besar pada hasil ELISA yaitu ELISA washer.
ELISA washer adalah instrumen laboratorium yang dirancang untuk mengontrol prosedur pencucian (wash) sampel yang diteliti yang disusun dalam format berbasis pelat maupun strip. Tahap wash pada proses ELISA memiliki dua pilihan pengerjaan yaitu secara manual maupun menggunakan mesin. Penggunaan mesin, dibandingkan dengan manual, memiliki beberapa keuntungan seperti waktu pengerjaan lebih ringkas, menghindari kontaminasi dan human error, serta lebih presisi sehingga menghindari terbuangnya reagen.
Secara umum penggunaan ELISA washer relatif mudah dan tidak membutuhkan usaha banyak. Peneliti tinggal memasukkan pelat atau strip berisi sampel ke dalam tempat yang telah disediakan dan mengatur program pada instrumen. Pengaturan program ini ada 2 jenis yaitu secara manual dan otomatis penuh. Pada pengaturan otomatis seluruh pengoperasian sudah diatur oleh mesin. ELISA washer kemudian akan mengeluarkan cairan dalam pelat/strip sebelumnya, kemudian merendam dengan buffer/ cairan pencuci, kemudian menyedot cairan tersebut melalui penghisap vacum dan mengentaskan pelat/strip. Selain ELISA, washer juga digunakan untuk mencuci kultur sel, susunan protein, Western blot dan pemurnian DNA. Kemampuan washer microplate ditentukan oleh beberapa parameter. Parameter pertama yaitu kompatibilitas dari instrumen ELISA washer, ada alat yang mampu menampung 48, 96 hingga 384 sumur, parameter selanjutnya yaitu jumlah channel atau saluran (6, 8, 16, 96 atau 384),kemudian juga jumlah cairan yang dikeluarkan (1 hingga 5 mililiter) dan kisaran volume yang dikeluarkan dan disedot (10 mikroliter hingga 3 mililiter) semuanya bervariasi menurut model instrumen. Secara umum, ELISA washer dirancang untuk hanya menyisakan 2 mikroliter residu per sumur dan beroperasi dengan akurasi <3% CV per sumur dan keseragaman <4% CV di seluruh pelat. Semua washer memungkinkan pengguna memprogram pemilihan tangki, volume, waktu per langkah, dan siklus untuk prosedur yang disesuaikan.
ELISA reader maupun ELISA washer merupakan komponen penting dalam teknik ELISA yang sangat mempengaruhi hasil penelitian. Oleh sebab itu, peneliti perlu memilih dengan baik kedua instrumen tersebut. Selain dari spesifikasi, harga ELISA reader dan ELISA washer juga pertimbangan penting dalam pengambilan keputusan. Salah satu rekomendasi instrumen ELISA washer sedang spesifikasi mumpuni dan harga ELISA washer yang relatif terjangkau adalah Stat Fax 2600.
Stat Fax 2600 adalah jenis ELISA washer berbasis microplate maupun microstrip yang dapat diprogram mandiri, mesin ini dapat digunakan untuk format standar 96 sumur apa pun. Panel sentuh dan layar LCD yang mudah digunakan membuat pemrograman dan pelaksanaan protokol pencucian dan pembilasan menjadi mudah. Stat Fax 2600 juga memiliki kemampuan untuk mencampur dan merendam larutan serta mempertahankan waktu yang konstan terlepas dari ukuran yang dijalankan. Pengentasan atau pengeringan dipusatkan pada bagian membulat dari sumur maupun pada bagian ujung-ujung dari dasar sumur yang datar. Perangkat lunak pintar secara otomatis menyesuaikan untuk peralatan plastik yang berbeda, sehingga peneliti dapat mencocokkan instrumen dengan peralatan plastik dari berbagai merek.
Instrumen Stat Fax 2600 ini memiliki beberapa fitur yaitu dapat digunakan untuk sumuran (dalam bentuk pelat maupun strip) berbentuk datar, membulat, maupun berbentuk V. Fitur lain yaitu bentuknya yang compact dan tidak banyak memakan tempat. Alat ini mampu secara otomatis memposisikan setiap pelat atau strip untuk proses pencucian (washing). Berkenaan dengan sistem perangkat lunak pintar-nya, alat ini mampu menyimpan 50 program protokol untuk pencucian, sehingga setiap peneliti dapat dengan mudah menggunakan alat tanpa dipengaruhi program yang dijalankan peneliti lain. Alat ini juga memiliki 6 mode dalam pencucian. Instrumen Stat Fax 2600 ini relatif “low maintenance” atau tidak terlalu sulit dalam perawatannya, serta alat ini memiliki sistem terbuka (open system) atau tidak bergantung pada reagen atau bahan habis pakai jenis tertentu.
Spesifikasi lebih lengkap dari instrumen Stat Fax 2600 dapat dilihat pada tabel berikut:
Parameter | Spesifikasi |
---|---|
Residual Volume | : < 3 µl |
Dispense accuracy | : < 3 % CV at 300 µl |
Processing time (full plate) | : 55 seconds aspirate/dispense with single or double aspirate |
Liquid contact materials | : Halogen lamp with lamp saver feature |
Display | : Two-line LCD, alphanumeric, 24 characters per line |
Keypad | : 16-key, domed membrane switch 4 x 4, enunciating |
Display Interactive | : Interactive touch screen 3.5” (8 cm) LCD, color graphic display |
Non-volatile memory | : Battery supported RAM, holds approx. 50 wash protocols |
Washing programs | : Aspirate, dispense, mix, soak - up to 99 minutes 99 seconds |
Special menu options | : Auto alignment - senses physical geometry of the wash head, plate, and carrier mechanism; Standby - disables pumps, releases vacuum and pressure; Self Check - performs internal performance test and auto alignment; Auxiliary - selection of well type, select auto/manual well depth and dispense depth, constant plate cycle time, viewing of preprogrammed tests, configure auto-rinse, set the time and date; Dispense volume auto calibration |
Dimensions & weight | : 15.5” x 13.5” x 7.5” (39 x 34 x 19 cm) Weight 19 lbs (8.6 kgs) |
Bottles | : Wash & waste 2 L, rinse 1 L, plastic with volume sensor probes |
Certifications | : NRTL listed, CE mark, ISO 13485:2003 |
Optional 2600 Plus model | : Additional 2 L wash bottle and additional solenoid installed, for added versatility and convenience. Stat Fax 2600 Plus, (must be requested at the time the order is placed. |